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小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞MC38是一種常用、易得且廣泛應(yīng)用于研究免疫治療、藥物篩選和腫瘤生長機(jī)制等方面的實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物模型。
已包含細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于細(xì)胞的體外培養(yǎng)。吸出舊培養(yǎng)基,用PBS洗兩次,加入2ml(/100mm培養(yǎng)皿)胰蛋白酶,顯微鏡下觀察,期間不要搖晃培養(yǎng)皿。當(dāng)細(xì)胞剛剛脫落時(shí),吸出大部分胰蛋白酶,留下約0.5ml,移入培養(yǎng)箱消化,取出約3min。傳代后,用6mlcm2-1培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹勻細(xì)胞,分裝3~6個(gè)培養(yǎng)皿。
一、小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞MC38之離心去除凍存液:
1、將解凍并*溶解的細(xì)胞快速放入離心機(jī)中,2000r/min或500g離心2min;吸棄上清液;
2、用8ml*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞(同派細(xì)胞庫可提供細(xì)胞對(duì)應(yīng)的*培養(yǎng)基=培養(yǎng)基+真品GIBCO胎牛血清+生長因子),吹制細(xì)胞懸液。細(xì)胞濃度以5×105/ml為宜;
3、將制備的符合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)瓶中,將培養(yǎng)瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中,8-24小時(shí)后更換溶液繼續(xù)培養(yǎng)。更換溶液的時(shí)間取決于細(xì)胞的生長情況。
二、接受小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞MC38后的處理:
1、收到細(xì)胞后,請(qǐng)先檢查培養(yǎng)瓶是否破損、滲漏,培養(yǎng)基是否混濁。如果培養(yǎng)基出現(xiàn)滲漏和混濁現(xiàn)象,請(qǐng)立即拍照并發(fā)給我們。
2、將75%酒精消毒瓶放入培養(yǎng)箱中4-6h后,在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),拍照100、200倍。如果貼壁細(xì)胞脫落,收集上清液離心,將沉淀物接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,換上新的培養(yǎng)基。
3、建議收貨當(dāng)天不要消化。如果細(xì)胞長到90%,可以選擇繼代培養(yǎng)。
三、小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞MC38在以下領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用:
免疫治療: MC38 細(xì)胞具有很高的抗原表達(dá)水平并且易于操縱,因此被廣泛作為腫瘤移植模型來評(píng)估新型免疫治 療方法 對(duì) 腫 瘤 的 影 響 。
藥物篩選 : MC3 8 細(xì) 胞 及其改進(jìn)品種可幫助我們測(cè)試化合物對(duì)癌 細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移擴(kuò)散之影響 。通過使用該模型系統(tǒng) , 科學(xué)家們可以評(píng)估各種基于不同分子機(jī)制設(shè)計(jì)出來 的抑制劑類藥物對(duì) 癌 細(xì)胞增殖、侵襲和凋亡等過程進(jìn)行干預(yù)之效果。
分子生物學(xué)以及遺傳學(xué):作為 易于操縱并進(jìn)行基因編輯 (CRISPR/Cas9) 的均衡器 , MC38 及其改進(jìn)品種可幫助我們?cè)O(shè)計(jì)解決特定 催化劑機(jī)制問題所需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件。