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說說小鼠小膠質(zhì)BV2的傳代方法和凍存方法

更新時(shí)間:2023-06-16 瀏覽次數(shù):2768

  小鼠小膠質(zhì)BV2是一個(gè)不斷增長(zhǎng)和分化的細(xì)胞群。由于其遺傳轉(zhuǎn)化,它具有無限的生長(zhǎng)潛力。體外培養(yǎng)的細(xì)胞系用于醫(yī)學(xué)或科學(xué)研究。事實(shí)上,連續(xù)細(xì)胞系可以在大量培養(yǎng)基中培養(yǎng)。隨著代數(shù)的增加,細(xì)胞的基因型和表型可能會(huì)發(fā)生變化。保證細(xì)胞純度在90%以上,并通過微生物檢測(cè),確保不含HIV、HBV、HCV、支原體、真菌等各類細(xì)菌。
  如果懸浮物來自血液、羊水、胸水或腹水,簡(jiǎn)單的方法是用1000r/min低速離心10分鐘。如果懸浮液體積較大,可適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間,但速度不宜過高,延遲不宜過長(zhǎng),以免擠壓或?qū)?xì)胞造成機(jī)械損傷。離心沉淀后,用無鈣無鎂PBS洗2次,培養(yǎng)基洗1次,調(diào)整合適的細(xì)胞濃度后,裝瓶培養(yǎng)。如果選擇懸浮液中的一些細(xì)胞,通常使用離心后的細(xì)胞分層液,因?yàn)橛捎诟鞣N細(xì)胞的比重不同,在離心后的分層液中可以形成不同的層,從而可以收獲靶細(xì)胞作為需要。
  
  一、小鼠小膠質(zhì)BV2傳代方法:
  1、輕輕吸去培養(yǎng)上清液,留下2-3ml培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞表面,吹掉細(xì)胞;
  2、混勻細(xì)胞,收集細(xì)胞培養(yǎng)基,900rpm離心3-5分鐘,棄上清;
  3、加入新的培養(yǎng)基,輕輕重懸細(xì)胞,均勻分布到新的培養(yǎng)瓶中;
  4、補(bǔ)充完整培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱進(jìn)行靜態(tài)培養(yǎng)。
 
  二、小鼠小膠質(zhì)BV2凍存方法:
  1、離心得到細(xì)胞沉淀后,加入配置好的凍存液,輕輕重懸細(xì)胞;
  2、盡快將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到標(biāo)記好的凍存管中;
  3、將凍存管轉(zhuǎn)移到程序凍存箱中,放入-80℃冰箱過夜,次日轉(zhuǎn)移到液氮中保存;如果沒有凍存實(shí)驗(yàn)室,可以在加入細(xì)胞后5-10分鐘將細(xì)胞置于4度的泡沫箱中。然后-20在2h保存,然后轉(zhuǎn)移到-80度過夜。第二天轉(zhuǎn)移到液氮中保存。

小鼠小膠質(zhì)BV2

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