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A2780 人卵巢癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)介紹
1) 來源:卵巢
2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:
(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;
(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
(3)收到細胞后請拍照,3天內如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。
細胞用途:僅供科研使用。
接受后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的*培養(yǎng)基。
4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。
5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們取得聯(lián)系。
培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;谷an酰胺,2mM;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二、A2780 人卵巢癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據實際情況按1:2到1:5的比例進行。
細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。
鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產品和技術服務:
一、原代細胞服務
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源;
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源;
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等;
原代細胞相關技術服務和整體實驗外包服務;
二、細胞株/系服務
細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關說明書;
細胞系培養(yǎng)過程的技術指導;
細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等;
三、iPS細胞
iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在);
iPS細胞增殖及冷凍保存;
iPS基礎培養(yǎng)技術實習;
新藥及實驗儀器上市前評估;
四、技術外包服務:各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務等
五、其他:根據客戶需要定制服務等
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